厌氧培养箱是用于培养厌氧微生物的关键设备,通过创造无氧环境确保微生物正常生长。以下是其使用须知,涵盖操作规范、安全事项及维护要点:
一、操作前准备
1. 环境检查
确保培养箱放置于通风、干燥、无腐蚀性气体的环境中,远离火源和高温。
检查电源、气源(如氮气、氢气、二氧化碳混合气)连接是否稳定,气体压力需符合设备要求。
2. 气密性检测
使用前需测试箱体密封性(如关闭舱门后抽真空,观察压力是否稳定),防止氧气渗入。
3. 耗材准备
提前放入预还原培养基、厌氧指示剂(如刃天青,无色表示无氧)、无菌手套等。
二、操作流程
1. 过渡舱使用
物品需通过过渡舱进出,遵循“抽真空 充惰性气体"循环(通常2 3次)以去除氧气。
避免频繁开启主舱门,防止氧气进入。
2. 培养条件设置
根据菌种需求调节温度(通常30 37℃)和气体比例(如85% N₂、10% H₂、5% CO₂)。
使用钯催化剂(常温或加热)去除残留氧气,需定期活化(160℃烘烤2小时)。
3. 样本操作
操作时佩戴无菌手套,避免污染。快速转移样本,减少暴露时间。
三、安全注意事项
1. 气体安全
氢气易燃易爆,确保气路无泄漏,远离明火。建议安装氢气检测报警器。
更换气瓶时需关闭总阀,排空残余气体。
2. 生物安全
处理病原菌时,需在箱内完成消毒(如紫外照射或消毒剂擦拭),废弃物经高压灭菌后处理。
3. 应急处理
突发停电时,立即关闭气阀,避免气体异常混合。恢复供电后重新校准环境。
四、日常维护
1. 清洁与消毒
定期用75%酒精或专用消毒剂擦拭内壁、手套等,防止污染。
过渡舱使用后及时清理残留物。
2. 催化剂与指示剂更换
钯催化剂每3 6个月或失效时更换(颜色变深提示失效)。
厌氧指示剂每次培养前检查,确保有效性。
3. 系统校准
定期校验温度传感器、气体流量计及氧浓度监测仪(如配备)。
五、常见问题处理
氧气残留:检查密封条是否老化,催化剂是否失效,必要时延长过渡舱排气时间。
湿度异常:箱内放置干燥剂或调节气体湿度(部分型号支持)。
污染迹象:消毒培养箱,检查灭菌物品操作流程。
六、长期停用
清空培养物,清洁箱体,释放舱内压力,关闭气源并断电。定期通电维护电路系统。
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