二氧化碳摇床(CO₂ Shaker Incubator)是一种结合了恒温摇床和二氧化碳培养箱功能的实验室设备,广泛应用于细胞培养、微生物发酵、生物反应等需要精确控制温度、CO₂浓度和振荡速度的实验。以下是几个典型的使用案例:
1. 哺乳动物细胞悬浮培养
应用场景:
用于HEK293、CHO(中国仓鼠卵巢细胞)等贴壁或悬浮细胞的培养,模拟体内环境以促进细胞生长。
参数设置:
温度:37℃(哺乳动物细胞*适温度)
CO₂浓度:5%(维持培养基pH稳定,通常配合HEPES缓冲液使用)
振荡速度:80 120 rpm(防止细胞沉降,促进氧气和营养均匀分布)
优势:
避免传统静态培养的缺氧问题,提高细胞密度和产物表达效率。
2. 微生物发酵(如大肠杆菌、酵母)
应用场景:
重组蛋白表达、质粒扩增或疫苗开发中的高密度微生物培养。
参数设置:
温度:30 37℃(根据菌株需求调整)
CO₂浓度:通常为环境空气(0.03%),但需根据实验需求调整(如厌氧菌需通入氮气替代CO₂)
振荡速度:200 300 rpm(增强溶氧量,促进菌体生长)
优势:
通过振荡提高氧气传递效率,缩短发酵周期。
3. 三维细胞培养(如类器官、球状体)
应用场景:
肿瘤研究、药物筛选中的3D细胞模型培养,模拟组织微环境。
参数设置:
温度:37℃
CO₂浓度:5%
振荡速度:40 60 rpm(低速防止球状体解体,同时保证营养渗透)
优势:
低速振荡可减少细胞聚团,形成更均匀的3D结构。
4. 杂交瘤细胞培养(单克隆抗体制备)
应用场景:
生产单克隆抗体时,杂交瘤细胞需要持续振荡以避免聚集和坏死。
参数设置:
温度:37℃
CO₂浓度:5 10%(部分高密度培养需更高CO₂)
振荡速度:100 150 rpm
优势:
提高抗体产量,减少培养过程中的剪切力损伤。
5. 植物细胞或藻类培养
应用场景:
生物燃料研究(如微藻产油)、植物次生代谢物生产。
参数设置:
温度:25 28℃(依物种调整)
CO₂浓度:1 5%(促进光合作用)
振荡速度:100 200 rpm(防止沉淀,增强光利用效率)
优势:
通过CO₂补加和振荡优化光自养或混养条件。
6. 病毒扩增(如疫苗开发)
应用场景:
利用Vero细胞等培养病毒(如流感病毒、新冠病毒)。
参数设置:
温度:35 37℃
CO₂浓度:5%
振荡速度:80 100 rpm(维持细胞悬浮,提高病毒滴度)
注意事项
无菌操作:需定期消毒摇床腔体,避免污染。
湿度控制:部分型号需加水盘维持湿度,防止培养基蒸发。
防污染设计:选择带HEPA过滤的型号,尤其用于长期培养。
二氧化碳摇床通过精确的环境控制,显著提升了细胞和微生物的培养效率,是生物制药、基因工程和基础研究中的关键设备。用户需根据具体实验需求优化参数,并定期校准CO₂传感器和温度探头。
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